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如何選擇適合研究的肝細胞培養(yǎng)試劑盒?原代 vs 永生化細胞系

更新時間:2025-07-22點擊次數(shù):163
   選擇適合研究的肝細胞培養(yǎng)試劑盒需基于實驗目標、周期及成本綜合考量,原代細胞與永生化細胞系各有核心優(yōu)勢:
  原代肝細胞培養(yǎng)試劑盒(如IPHASE兩步膠原酶灌流法試劑盒)適合藥物代謝、毒性評估等高真實性需求場景。其核心優(yōu)勢在于:
  功能保真性:試劑盒通過優(yōu)化膠原酶濃度與灌注流程,分離的細胞存活率超90%,且維持CYP450酶、II相代謝酶等正常生理濃度,可精準模擬體內代謝環(huán)境。例如,Takara的CellartisPowerPrimaryHEPMedium支持原代肝細胞培養(yǎng)14天以上,仍保持尿素合成、藥物轉運等功能。
  短期實驗經濟性:單次實驗成本低,試劑盒提供即用型灌流液、純化液等,24孔板可重復使用400次,適合短期藥物篩選或機制研究。
  倫理與成本優(yōu)勢:避免動物實驗倫理爭議,且成本僅為動物模型的1/3,符合3R原則。
  永生化肝細胞系試劑盒(如SV40T或hTERT介導的永生化試劑盒)適合長期傳代、高通量篩選等場景。其核心優(yōu)勢在于:
  增殖穩(wěn)定性:通過導入永生化基因(如SV40T抗原),細胞可傳代50代以上,群體倍增時間縮短至28小時,解決原代細胞體外增殖受限問題。例如,永生化胎肝細胞系IMF-Hep的ALB與CYP3A4表達量達原代細胞的85%,且30代內核型穩(wěn)定。
  功能可調控性:部分試劑盒支持iPS細胞向肝細胞定向分化,獲得功能成熟的肝細胞,適用于肝臟發(fā)育或疾病模型研究。
  長期實驗成本效益:雖初始成本較高,但長期使用可大幅降低單次實驗成本,適合需要反復傳代的實驗。
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